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高效液相色谱仪(HPLC/UPLC)的基本组成与各部分功能(按液路流向列出,含常见可选模块): 溶剂槽(溶剂瓶) 存放流动相溶剂(多种溶剂用于等度或梯度)。需无颗粒、脱气且标识清楚。 脱气装置(在线脱气器 / 超声/真空脱气) 去除溶剂中溶解气体,防止色谱基线噪声和气泡导致泵击穿或检测器噪点。 泵(恒流/高压泵,单向、二元/三元/四元混合或梯度泵) 提供稳定可控的流速与工作压力(普通HPLC到数百bar,UHPLC更高)。负责溶剂混配与梯度程序。 进样装置(手动进样器或自动进样器/样品台) 将样品定量引入流路。自动样品器支持不同进样体积、稀释、洗针、冷藏等功能。 前处理/除颗粒元件(进样阀、滤器、前置柱/保护柱、在线SPE等) 保护主柱、去除微粒或浓缩/净化样品,延长色谱柱寿命并减少污染。 色谱柱(分离柱,含填料与维持柱温的柱箱) 核心分离单元(反相C18、C8、HILIC、离子交换、尺寸排阻等),柱温箱用于温度控制以提高重现性。 检测器(可选多种) 紫外/可见检测器(UV/DAD/PDA):最常用,选择性好。 荧光检测器(FLD):高灵敏、选择性强。 折光检测器(RI):用于不吸UV的组分(受梯度限制)。 蒸发光散射检测(ELSD)、电荷盒检测(CAD):检测非挥发性无色物质。 质谱(LC–MS/MS/高分辨MS):灵敏且用于结构鉴定和痕量定量。 其他:电化学检测器等。 压力/流量/温度监测与保护元件(压力传感器、流量计、单向阀、泄压装置) 实时监控系统状态,保护设备与柱子。 废液/收集器(Fraction collector,可选) 收集目标组分或废液,制备色谱常用。 数据采集与控制系统(工作站软件) 控制泵、进样器、梯度、柱温与检测器;采集与处理色谱谱图,定量、报告与系统日志。 附件与外围设备 样品冷却台、自动清洗系统、超声/超滤装置、溶剂过滤器、密封件与接头、备用柱、标准品与维护工具。 补充:UHPLC/UPLC 与普通HPLC 的不同点 更高耐压的泵与密封件、更小内径/更短柱、高压耐受填料、低额外柱容(extra‑column volume)以支持更快更高分辨率的分离。 典型液路示意(简化) 溶剂槽 → 脱气器 → 泵(混合/梯度) → 进样器(/前处理) → 色谱柱(柱温箱) → 检测器 → 数据系统 → 废液/分馏 |
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