高效液相色谱仪性能确认

高效液相色谱仪（HPLC）的性能确认是保证仪器能够满足分析要求的重要步骤。所谓性能确认，指的是对HPLC系统的各项关键性能进行检测和评估，确保仪器状态和功能符合法规或方法标准的相关要求。这一环节是分析实验室质量管理体系（如GLP/GMP、ISO/IEC 17025等）的必要内容，也称为“系统适用性确认”或“仪器合格性确认”（PQ/Performance Qualification）。

下面系统介绍高效液相色谱仪的性能确认内容和流程。

一、确认范围

主要包括：输液系统（泵）、进样器、柱温箱、检测器、数据处理等模块的关键参数。

二、性能确认的常见项目与方法

1. 流量准确性（泵）

内容：设定流速后，以量筒收集出液体积并测时，计算实际流速。

标准：实测流速与设定流速的相对偏差一般应≤2%。

方法：如设1.00 mL/min，连续收集10 min，应收1.00×10=10 mL，称重或量取。

2. 流量稳定性（泵脉冲性）

内容：同一条件下多次收集同一时间内的流出液体积，或观察总离差。

标准：通常RSD≤1%（具体按厂家或法规）。

3. 进样重复性（自动/手动进样）

内容：用同一标准溶液分析多次进样，考察峰面积或峰高的RSD。

标准：一般RSD≤1%（≤2%视检测条件及法规）。

4. 检测器噪音与漂移

内容：

噪音：基线的短时波动大小（列如5min内峰—谷差）。

漂移：基线的长期慢漂移幅度。

标准：按厂家说明书或方法标准（如UV检测噪音<20μAU，漂移<100μAU/h）。

方法：装纯溶剂，设定参数，空运行，测量基线波动。

5. 检测器线性范围与相关性

内容：用不同浓度的标准溶液进样，绘制校准曲线，计算相关系数R²。

标准：R²≥0.99，满量程无明显响应饱和。

6. 保留时间重复性（恒流速下、同一柱）

内容：测定相同组分多次色谱的保留时间RSD。

标准：RSD通常≤1%或更小。

7. 柱温箱控温性能

内容：设置某一温度，检测实际温度（内置传感器或温度计）。

标准：与设定值偏差≤±1℃，一般±0.5℃。

8. 死体积/保留体积测试

内容：用不可保留物质（如尿素、甲酸钠等）测柱死体积。

标准：资料对比，无异常，结构吻合。

9. 其它确认项（视仪器及方法）

检测器波长准确性（UV-Vis用校准滤光片或标准溶液），如铬酸盐等。

自动进样器定位准确性。

混合器或梯度比例准确性等。

三、确认流程和注意事项

建立确认方案（含参数、标准、方法、频次）。

使用校准过的量具、标准品和工具。

逐项测试并记录原始数据。

和技术参数、法规或方法要求比对，判定是否合格。

确认单据需双人校核、签字，确保数据可靠性。

确认周期：多数实验室建议新购机初次确认，每年/每半年周期性确认，或维修后、搬运后重新确认。