液相色谱哪些流动相不能混用

1. 含无机盐缓冲液与高比例有机溶剂（如乙腈、甲醇）不可直接混合

比如：磷酸缓冲液、醋酸钠缓冲液、硫酸钾缓冲液等 与乙腈、甲醇直接混合，当有机相比例高于50%甚至更高时，许多无机盐溶解度极低，会迅速析出沉淀。

沉淀会堵塞色谱柱、进样器、管路和泵，造成设备损坏。

实验中若需混合，必须确保无机盐在有机相中的溶解度，并一般推荐总有机相比例低于30%。

2. 强酸和强碱流动相不能混用

如含盐酸、磷酸的流动相与含氢氧化钠、氨水的流动相混合，可能发生中和或沉淀反应（如磷酸钙、磷酸镁沉淀）。

不但影响分离效果，还会损坏色谱柱的填料和管路。

3. 含金属离子的缓冲液与含硫化物或卤素类试剂不可混用

易生成难溶沉淀（如AgCl、CuS），导致管路和柱堵塞。

4. 不同有机溶剂混合前要注意互溶性和比例

如乙腈、甲醇、异丙醇等一般互溶，但高浓度或混合其它成分（如缓冲盐），有时会出现微相分离或析晶现象。

5. 醋酸铵、甲酸铵、三乙胺等缓冲剂在高比例异丙醇等有机溶剂中溶解度低

使用时应查询溶解度，否则高比例有机相下可能形成析出。

6. 部分流动相在强度变化或系统冲洗时也容易出现问题

比如用磷酸盐缓冲液的方法分析后，直接用纯乙腈冲洗系统，易在管路或接口处产生盐析。

应先用纯水洗去盐，再用有机溶剂冲洗。

典型不能混用组合举例

流动相A 流动相B 现象/问题

磷酸盐缓冲液 乙腈、甲醇 盐沉淀，堵塞系统

醋酸钠缓冲液 乙腈、高异丙醇 盐沉淀

盐酸或磷酸 氢氧化钠/氨水 沉淀、pH急剧变化

金属离子缓冲液 含硫试剂、卤素 难溶金属盐沉淀

醋酸铵、甲酸铵 高比异丙醇、有机溶剂 缓冲剂低溶解度沉淀