高效液相色谱柱的五大填装方法

高效液相色谱（HPLC）柱的填装方法，直接影响柱效、理论塔板数、分离重复性与柱寿命。常用于实验室及工业界的主流填装工艺主要有五种，分别是：

1. 湿法填装（Slurry Packing，湿法装柱）

原理： 将色谱填料先用适宜溶剂制成悬浮浆料，通过高压将浆料装填到色谱柱内。

过程：

配制悬浮浆料，保持均匀分散。

利用高压泵或加压气体将浆料注入柱管。

保持压力，使填料充分堆积、定型。

装顶塞、平衡柱子。

优点： 粒子分布均匀、柱效高、适用于粒径3~10μm常规模柱和现代亚2μm UHPLC柱。

应用最广、实验室和工业常用。

2. 干法填装（Dry Packing）

原理： 直接将干燥的填料倒入柱管，通过振荡或敲击使其填紧，再用溶剂冲洗、定型。

过程：

将干填料慢慢倒入柱管，适当振动，使其致密堆积。

加入柱头和顶塞。

用移动相溶剂缓慢冲洗，进一步定型。

优点： 操作简单，适用于较大粒径填料（一般＞10μm），如重力流柱（玻璃柱、开管柱等），对精密分析用HPLC柱而言已很少采用。

3. 径向填装（Radial Compression Packing）

原理： 特殊的装柱机构设计，使柱壁能产生径向压力，对填料进行侧向压紧，改善柱床均匀性。

过程：

采用可调径向压力的柱管或模块，在柱内进行径向挤压填装。

柱床均匀、压力分布好。

优点： 机械压实，减少空隙和流动通道，提升柱效。 主要用于大型制备色谱柱和多柱模块。

4. 动态填装法（Dynamic Axial Compression Packing，DAC动态轴向压缩）

原理： 在装柱和分离过程中，通过柱塞实时、轴向持续加压压缩填料，保持填料处于最佳致密状态。

过程：

柱管一端或两端有可移动柱塞，与液流同步自动调整压力，实现动态高压下填装和分离。

优点：

柱床不易松弛，柱效稳定，重复填装简单。

常用于工业级大型制备柱（如DAC大柱）。

5. 递增法/分段填装（Incremental/Stepwise Packing）

原理： 将填料和溶剂以多次、分批的方式逐步装入柱管，每次装填量适中，分批加压整合，避免一次装填过多造成颗粒分级或密度不均。

过程：

分阶段添加填料，每阶段都有短暂加压过程。

循环多次直至填满柱管，最终高压定型。

优点： 提高填料均匀度，适合难以一次填满、柱体较长或粘性较大浆料。