色谱装柱机操作流程

色谱装柱机的操作流程因柱子类型（分析/制备）、装柱方式（湿法/干法）及设备型号不同而有细微差异，但基本原理和主要流程大致一致。下面以最常用的湿法装柱（Slurry Packing，适用于分析与制备柱）为例，详细介绍色谱装柱机的标准操作步骤。

一、准备工作

1. 设备和材料检查

装柱机主机：检查密封、清洁、接口完整。

柱管及配件：选好柱管规格，检查柱床、堵头、筛板，确认无损伤、洁净。

填料：选择合适粒径的填料（如C18、C8、硅胶等），必要时预处理（如预湿、脱气）。

溶剂：根据填料及柱管类型选择（如甲醇、水、乙腈等，要求高纯）。

搅拌棒/磁子：辅助浆料均匀。

二、湿法装柱标准流程

1. 配制浆料（Slurry Preparation）

称取适量填料于烧杯中，加入适量溶剂（如甲醇），充分搅拌使其分散均匀，避免结团。

用超声或磁力搅拌排除气泡，确保浆料均匀悬浮。

2. 柱管准备与组装

将柱管竖直固定于装柱机（底部先装好筛板、过滤网）。

注入少量溶剂（匹配填料、冲洗柱管）。

检查柱管密封。

3. 填装浆料

在浆料仍处于均匀分散状态下，通过装柱机将浆料注入柱管。

装柱机可利用泵或压力（如气体、液体）将浆料推入柱管底端。

4. 加压/装填成型

按要求设定压力（分析柱常为10-100 bar，制备柱高可达400-600 bar），启动加压系统。

在设定压力下，继续进液（可边进浆液边进纯溶剂），促使填料粒子均匀紧密地堆积在柱管内。

保持压力一段时间（如10-60分钟），保证填料充分定型、孔隙均匀。

5. 顶塞安装与密封

停止进液，排除柱管内多余溶剂和浆料。

装上柱管顶塞，确保密封无气泡。

用溶剂反冲（Frit洗液）排除柱头积液和未填实填料。

6. 装柱完毕，检查柱性能

固定好柱头和端塞，取下柱管，准备后续安装进色谱仪。

用适当流速、溶剂对新装柱进行预冲洗、平衡。

可用尿素、甲基苯等标准样品测试柱效（理论塔板数、压力测试、峰型、流量）。

三、注意事项

填料浆液始终保持均匀悬浮，防止填料沉降造成柱床不均。

溶剂必须高纯、无杂质、无颗粒，防止堵塞筛板或柱床。

加压过程保持平稳、切勿骤升骤降，防止柱床开裂或空洞。

装柱完成后可逐步提高流速，观察压力变化。

安全操作，防止高压装柱时漏液或爆裂。

柱管内不得有气泡或残留大颗粒异物，影响色谱效果。

四、简单操作流程汇总（快速参考）

预处理填料与溶剂

配浆并均匀搅拌

柱管组装、洗净并装好底塞

用装柱机加压填装浆料至柱内

保持压力至填料定型

装好柱头顶塞、确保密封

平衡冲洗柱子，检测柱效

五、干法装柱（简要，仅部分填料适用）

将干填料直接倒入柱管，适量振动/机械冲击使堆积均匀。

填满后缓慢加溶剂冲洗柱床，并安装顶塞，测试柱性能。