SPE回收率低的原因

一、SPE回收率低的主要原因

1. 目标物未被有效保留（载入时流失）

柱的选择与目标物极性/性质不匹配（如用C18柱萃取极性很强的物质，导致直接流失）。

柱平衡不彻底（活性位点未被激活，保留能力下降）。

载样时样品强溶剂或体积过大，目标物无法与固定相作用被直接冲走。

2. 目标物在洗涤或漂洗步骤丢失

洗脱剂或洗涤剂的极性过强，把目标物一同洗脱（如用含有机溶剂的洗涤液而目标物极性较强）。

洗涤步方法不当（体积太大或浓度不合适）。

3. 目标物未能完全从固定相洗脱（残留在柱上）

洗脱溶剂极性或强度不够，目标物洗脱不彻底。

溶剂选择不合适，没有破坏目标物与固定相之间的作用力。

4. 目标物在处理过程中降解或转化

pH不当，导致目标物结构变化或分解。

样品长时间暴露在高温、氧化环境下，导致部分降解。

5. 柱容量不够或柱污染

目标物量太多，超出固定相容量。

固定相因污染、堵塞、重复使用，吸附能力下降。

6. 其他机械损失

转移样品时残留、吸附在管壁、耗材上。

干燥/浓缩步骤挥发损失。

二、常见诊断与解决思路

问题表现 主要原因 解决办法

上样后几乎测不到目标物 固定相选择不当/上样溶液太强 换合适的固定相或优化上样溶剂及动力学

洗脱后目标物含量明显降低、峰消失 洗涤液带出目标物/洗脱不彻底 优化洗涤液强度/选择更强的洗脱剂/调整洗脱体积

目标物浓缩干燥后回收率低 挥发、降解/管壁吸附 控温缓慢浓缩/用惰性气体吹干/管壁加保护剂，减少暴露时间

小分子极易流失 上样体积大、溶剂极性强 调整样品稀释度、必要时预处理样品

三、优化建议

选择合适的SPE固定相和类型

根据目标化合物极性（极性/非极性/离子交换/特殊功能基团）进行选择。

做平行实验优化固定相。

样品溶剂与体积处理

上样前用少量纯水/流动相稀释样品，降低有机溶剂比例。

控制上样体积，尽量保证目标物有时间与固定相充分结合。

严格优化洗涤/洗脱条件

洗涤液不宜太强，防止目标物流失，可分步增加有机相比例直至刚好不流失目标物。

洗脱剂要足够强，能够准确、高效解吸目标物。

柱平衡和活化要充分

通常：有机相润湿 → 水活化 → 进样，操作过程中每一步都应使用足够体积通栏。

样品处理温度和pH控制

严格控制pH在目标物稳定区间，尽量在低温避光条件下操作。

浓缩与转移注意防损失

尽量避免样品浓缩至完全干燥，或分步转移可加洗。

若目标物极易吸附，可在收集液加保护剂或表面活性剂。

四、简单排查方法

在上样液、洗涤液、洗脱液分别测定目标物含量，溯源丢失步骤。

用标准品做回收率测试和空白试验，判定是否有降解、吸附等非特异性损失。