1. 杂质为异构体混合物(结构/手性/顺反异构) 加标溶液里的杂质,如果本身为异构体(如顺/反异构、手性对映体,或者位置异构体),而你的色谱分离方法对此类结构有分离能力,就会出现两个峰(即“双峰”)。 比如杂质A有A1和A2两种异构体,标准品本身即为两种结构的混合物,且色谱可以分开,自然呈现双峰。 判断方法: 查标准品说明书或MSDS,是否标明存在异构体(常见于杂质标准品或消旋体)。 查分析方法,是否为手性色谱柱、异构体分离优化条件。 2. 加标溶液中杂质纯度不够,含有副成分 杂质标准品若不够纯,含有部分降解产物或其它相关物质,这些组分和主杂质响应值接近,保留时间相近也会导致双峰。 3. 方法参数/仪器原因 色谱流动相比例、柱温或进样方式欠优化时,存在峰分裂(不是两个化学成分,而是一个组分在条件下分成两峰)。 进样量过大、柱头活性点导致样品部分吸附拖尾或者二次分布。 色谱柱出现轻微老化或污染,也会导致峰分裂。 4. 杂质发生互变/变构或基质影响 有的杂质如酮-烯醇互变,或者顺反异构体比例随溶液环境变化,或样品溶剂促使杂质转变,也可导致双峰。 加标溶液溶剂与杂质发生物理/化学作用,杂质在系统中呈现不同状态。 5. 其它特殊情况 杂质与基体中其它物质发生缔合或弱反应,同一杂质以不同形式出峰。 标准品超期或储存条件不佳产生分解产物。 加标操作不均(不同溶液间混杂导致) |
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