C18色谱柱选择技巧

C18色谱柱（十八烷基硅胶柱）是液相色谱中最常用的反相柱，广泛应用于医药、食品、环境、化工等行业的成分分析、纯度检测及杂质分离。市面上C18柱种类繁多，选择合适的C18柱对于分离效率、稳定性、重现性及方法开发至关重要。下面从关键参数、应用场景、选择建议、常见品牌等方面系统说明。

一、C18色谱柱选择需关注的主要参数

1. 硅胶基质（粒径、纯度、孔径）

粒径（Particle size）：常见有5 µm、3 µm、2.6 µm、1.7 µm。粒径越小，分辨率越高但柱压越大。

端基覆盖（End-capping）：未端基覆盖的柱子硅醇基活性大，容易出现拖尾尤其对碱性化合物不利。优选充分端基处理的柱子。

孔径（Pore size）：常规为80–120 Å（适合小分子），300 Å 适合蛋白、肽等大分子。

2. 碳载量与键合方式

碳载量（%C）：决定疏水性，碳载量高保留能力强，一般8%–22%。样品极性大选低载量，回收速率快；疏水性强选高载量柱。

键合方式：单键合/双键合，有些柱子有特殊工艺，如双端基保护，更耐酸碱或高温。

3. 柱规尺寸

柱长（如100、150 mm）、内径（如4.6、2.1 mm）决定理论塔板数与通量，分析型与半制备型选取不同。

一般标准柱为4.6×250 mm或4.6×150 mm，UPLC小柱为2.1×50 mm等。

4. 柱的pH适应范围

部分C18柱只能用在pH 2-8范围，有些耐pH 1-12，需看样品体系、流动相设定。

5. 柱床均匀性&批次一致性

优质品牌柱子具备高重现性，批次间性能差异很小，对定量分析尤为重要。