进样瓶导致峰面积异常

一、现象描述

色谱结果中某批次（或某几个）样品的“峰面积突然增大或减小”、出现重复性变差、鬼峰、或某些组分丢失等异常现象。

更换进样瓶/隔垫后，峰面积恢复正常或出现明显变化。

二、原理与可能原因

1. 进样瓶“吸附”或“析出”作用

进样瓶或隔垫材料本身存在“吸附作用”：

部分化合物特别是极性/疏水性/大分子，易被玻璃瓶或某种内涂材料吸附，导致浓度降低，峰面积降低，回收率变低。

隔垫材质残留物（如硅橡胶、PTFE等）可能与样品发生作用。

杂质“析出”污染：

进样瓶未清洗干净，有杂质或溶剂残留时，有可能析出干扰，导致鬼峰或者基线噪音增加。

部分进样瓶、隔垫在高温或强溶剂下溶出物进入样品，引起峰面积“意外增加”或多出异常峰。

2. 进样体积误差

进样瓶气密性不良、瓶口或隔垫老化，导致自动进样系统取样量不准确。

瓶内液位过低、进样针无法准确吸取到样品，也会导致峰面积减小且重现性差。

3. 进样瓶类型不匹配

普通玻璃与“琥珀色、内涂硅烷化、惰性衬里”等瓶型不匹配特定分析需求。

水溶液分析推荐玻璃内壁惰性处理；某些亲脂性物质分析需选用专用瓶；蛋白分析常用聚丙烯瓶，防止非特异性吸附。

4. 进样瓶老化、结晶物污染

反复使用的进样瓶表面有残留物、洗涤不净，影响样品准确性。

三、具体表现

峰面积异常突然放大/缩小，无规律波动。

空白样品、高浓度标准等出现异常曲线。

不同批次或不同品牌进样瓶测试，色谱重现性明显不同。

四、排查及典型案例

排查流程：

检查进样瓶批次、材质、品牌是否更换；

检查清洗方式是否达标，有无异味、颗粒等；

瓶中加纯溶剂空白上机，看有没有“鬼峰”或基线不稳；

更换新瓶、隔垫测试对比色谱响应变化；

检查进样体积，是否由液位或气密性导致。

典型案例：

有样品分析发现，用某品牌新买的进样瓶进样，峰面积普遍偏低，换回旧品牌后即刻恢复正常。经查新瓶未彻底清洗，瓶内微量添加剂导致主组分吸附。

高挥发性有机溶剂分析，使用普通隔垫导致逐批峰面积变小，换为PTFE/硅橡胶隔垫解决。

长时间分析蛋白类样品，普通玻璃瓶吸附蛋白或肽类，导致峰面积明显偏低，改用惰性处理瓶型改善。

五、建议与解决办法

选择合适进样瓶、隔垫材质：根据分析对象特点（极性、亲水/亲脂、蛋白/小分子）科学选择进样瓶，如内壁惰性化、琥珀色避光、防吸附专用瓶等。

进样瓶使用前须彻底清洗：新瓶第一次使用建议用超声波+纯溶剂处理，防止添加剂残留。

检查隔垫匹配性及状态：老化、掉屑、配合不紧密的隔垫容易造成进样不准或杂质析出。

进样前确保液面合适且无气泡：避免抽不到液体或偶尔吸入气体导致体积不准。

出峰面积异常时及时更换验证：如怀疑瓶问题，直接换全新瓶/隔垫，并做对照试验，可迅速排除错误。

做空白样本实验：加溶剂不上样，检测有无鬼峰或异常响应。